基于CRISPR/Cas9系統(tǒng),通過單載體集成多sgRNA,實(shí)現(xiàn)Cas9蛋白對多個(gè)目標(biāo)位點(diǎn)的識(shí)別,誘導(dǎo)雙鏈斷裂 (DSB),從而引入插入/缺失突變(Indels),實(shí)現(xiàn)多基因敲除。


(1)功能基因研究:支持同源基因功能冗余,基因上下游調(diào)控研究;
(2)作物改良:快速高效對多個(gè)性狀進(jìn)行同時(shí)改良,加速性狀創(chuàng)制。

(1)多靶點(diǎn)靈活編輯:單載體最多可集成20個(gè)sgRNA靶點(diǎn),靈活支持“一敲多”(單sgRNA靶向多基因)、“多敲一”(多sgRNA靶向單基因)及“多敲多”(多sgRNA靶向多基因)的編輯模式,適配復(fù)雜基因調(diào)控需求;
(2)高效率編輯系統(tǒng):采用不同snRNA啟動(dòng)子(如OsU6、AtU6),驅(qū)動(dòng)多sgRNA獨(dú)立高效表達(dá),規(guī)避載體重組風(fēng)險(xiǎn),提升編輯效率。針對物種不同,進(jìn)行Cas9密碼子優(yōu)化,提升蛋白表達(dá)水平,水稻編輯效率穩(wěn)定≥90%;
(3)高效載體組裝技術(shù):結(jié)合Golden Gate/Gibson無縫克隆技術(shù),實(shí)現(xiàn)sgRNA模塊化組裝;
(4)多物種兼容性:覆蓋水稻、擬南芥、玉米、大豆等作物,支持定制化載體設(shè)計(jì)。

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