
大片段刪除是指基于CRISPR/Cas9系統(tǒng),通過向?qū)NA(sgRNA)引導Cas9蛋白靶向特定位置產(chǎn)生雙鏈斷裂,激活微同源末端連接(Microhomology-mediated end joining,MMEJ)的DNA修復機制,將斷裂的兩端利用微末端同源序列(Microhomologous,MHS)連接在一起。


調(diào)控元件或非編碼DNA的研究:借助NHEJ介導的單靶點編輯去進行調(diào)控元件或非編碼DNA的研究往往只能產(chǎn)生少數(shù)堿基的插入/缺失突變, 很難有效破壞這些非編碼DNA序列的功能,而利用微同源末端連接的大片段刪除則能進行整個調(diào)控元件或非編碼DNA的刪除。

(1)自主開發(fā),通過設(shè)計兩個sgRNA,即可實現(xiàn)基因組DNA片段的大片段刪除;
(2)具有穩(wěn)定、高效的植物遺傳轉(zhuǎn)化體系,可快速獲得片段插入或刪除植株。

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