蛋白亞細(xì)胞定位技術(shù)是研究蛋白在細(xì)胞體內(nèi)的位置及分布的一種分子生物學(xué)技術(shù)。利用目標(biāo)基因與報告基因(熒光蛋白)融合載體,借助于細(xì)胞瞬時轉(zhuǎn)化或穩(wěn)定遺傳轉(zhuǎn)化技術(shù),在細(xì)胞內(nèi)正常表達(dá),使用熒光顯微鏡觀察目標(biāo)蛋白在細(xì)胞中的位置,從而分析目標(biāo)基因的相關(guān)功能。

(1)有多種熒光蛋白可供選擇,如GFP、RFP、YFP等;
(2)有多種細(xì)胞器Marker蛋白載體,如細(xì)胞核,細(xì)胞膜,線粒體,葉綠體等;
(3)具有成熟的瞬時轉(zhuǎn)化體系和穩(wěn)定轉(zhuǎn)化體系;
(4)單雙子葉受體材料可供選擇:水稻、擬南芥、煙草、小麥、大麥、玉米原生質(zhì)體或煙草葉片。
客戶提交實驗詳細(xì)信息(ORF序列,預(yù)測位置)——對客戶提交信息和材料的確認(rèn)——選取合適的熒光蛋白和融合C端或N端——設(shè)計引物擴(kuò)增并構(gòu)建載體——原生質(zhì)體的制備及瞬時轉(zhuǎn)化——圖片信息的采集和處理——撰寫提交——實驗報告。
(1)融合載體構(gòu)建的序列和測序結(jié)果。
(2)提供蛋白定位的原始圖片和處理圖片信息。